【摘 要】
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目的：分析葛根素在共培养SD大鼠皮层神经元和星形胶质细胞中的分布差异.方法：原代分离培养神经元和星形胶质细胞,分别以MAP2、GFAP抗体结合DAPI染色进行免疫荧光鉴定并以Transwell膜为骨架建立两种细胞的共培养体系,建立受试细胞内葛根素含量的荧光分光光度分析方法,分别在单独培养及共培养的神经元与星形胶质细胞培养液内加入葛根素溶液至终浓度为1000 ng/mL,并进行药物加入后不同时间两种
【机 构】
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西南大学药学院中医药学院、重庆市药效评价工程技术中心,重庆400716;西南大学荣昌校区,重庆荣昌402460
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目的：分析葛根素在共培养SD大鼠皮层神经元和星形胶质细胞中的分布差异.方法：原代分离培养神经元和星形胶质细胞,分别以MAP2、GFAP抗体结合DAPI染色进行免疫荧光鉴定并以Transwell膜为骨架建立两种细胞的共培养体系,建立受试细胞内葛根素含量的荧光分光光度分析方法,分别在单独培养及共培养的神经元与星形胶质细胞培养液内加入葛根素溶液至终浓度为1000 ng/mL,并进行药物加入后不同时间两种细胞内葛根素含量的差异分析.结果：免疫荧光鉴定两种细胞的纯度分别为神经元96.50±0.87、星形胶质细胞97.67±0.10,荧光分光光度法的专属性、精密度、回收率及线性关系良好,神经元内葛根素的含量高于星形胶质细胞,药物加入后20min,细胞内药物浓度达到峰值,加入药物后60min-90min,星形胶质细胞内未见葛根素检出,神经元样品内药物维持在12.8 ng/mL.结论：葛根素在神经元内比星形胶质细胞内具有更高的浓度及更长的保留时间.
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