【摘 要】
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将鹅源副粘病毒NA-Ⅰ株毒种接种于11日龄SPF鸡胚,收集36～72h死亡的鸡胚尿囊液.参考已发表的鹅源副粘病毒F基因序列,设计并合成了一对特异性引物,用以扩增鹅源副粘病毒NA-1株F
【机 构】
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吉林大学预防兽医学国家重点学科,动物重要病原与疫病研究室,吉林长春,130062
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会
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将鹅源副粘病毒NA-Ⅰ株毒种接种于11日龄SPF鸡胚,收集36～72h死亡的鸡胚尿囊液.参考已发表的鹅源副粘病毒F基因序列,设计并合成了一对特异性引物,用以扩增鹅源副粘病毒NA-1株F基因,预期扩增的F基因片段包含完整的开放阅读框.通过RT-PCR扩增出鹅源副粘病毒NA-1株F基因片段,琼脂糖凝胶电泳回收、纯化,得到F基因片段,经EcoRⅠ,SalⅠ消化。将F基因克隆进入PCI-neo载体,转化大肠杆菌DH5α,挑选菌落,经限制性核酸内切酶SalⅠ和EcoRⅠ双酶切及PCR鉴定,结果证明重组真核表达载体PCI-neo-F构建成功,为下一步在哺乳动物细胞Vero细胞中表达打下良好的基础。扩增的F基因测序后,与其他禽副粘病毒1型F基因进行了核苷酸、氨基酸序列及系统发育树的分析比较,为阐明鹅源副粘病毒NA-1株的遗传背景奠定了基础。
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