【摘 要】
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根据已发表的鹅源副粘病毒(GPMV)NA-1株F基因序列设计两对引物,引物中含有突变位点分三次扩增F基因片段,从而得到目的基因片段,再利用酶切位点。将基因片段与转座载体pFastBa
【机 构】
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吉林大学预防兽医学国家重点学科,动物重要病原与疫病研究室,吉林,长春,130062
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会
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根据已发表的鹅源副粘病毒(GPMV)NA-1株F基因序列设计两对引物,引物中含有突变位点分三次扩增F基因片段,从而得到目的基因片段,再利用酶切位点。将基因片段与转座载体pFastBac Ⅰ连接,获得重组质粒,命名为pFastBac I-F,从而使改造后的F基因编码的氨基酸裂解位点。为112Gly-Arg-Gln-Gly-Arg-Leu117.并将pFastBac I-F进行测序鉴定后转化到DH10Bac宿主菌,将目的基因定向插入到Bacmid质粒中,经筛选获得的重组Bacmid F转染Sf9昆虫细胞,并进行表达检测。结果,表达产物经SDS-PAGE和Western-blot检测获得蛋白特异条带,相当分子量约63 KDa.
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