【摘 要】
：
目的:开发一种稳定性良好的体积排阻色谱方法,用于单克隆抗体单体与聚合体的分析分离.并研究流动相组成(pH和离子强度)、流速以及色谱柱长度等参数对SEC分离的影响. 方法:
【机 构】
：
沃特世公司 美国马萨诸塞州米尔福德市枫树街34号
【出 处】
：
2015年生物技术药物理化特性分析与质量研究技术研讨会
论文部分内容阅读
目的:开发一种稳定性良好的体积排阻色谱方法,用于单克隆抗体单体与聚合体的分析分离.并研究流动相组成(pH和离子强度)、流速以及色谱柱长度等参数对SEC分离的影响.
方法:对一组蛋白标准品混合物,基于峰形、分离度、校准准确度以及定量结果对SEC方法进行评估.通过调整该方法所涉及的多个参数来改善分离效果和提高方法稳定性(对分离效果的评估基于色谱柱校准、分离度以及聚集体定量等多个标准).
结果:在单抗及其聚集体应用中,1)当氯化钠浓度从50升至200 mM时,较大的离子强度可减少mAb单体的峰拖尾现象并使峰形更窄;而当流动相离子强度从200升至250 mM氯化钠时,上述变化不再明显.2)缓冲液pH会影响次级相互作用.pH变化时单体的洗脱曲线发生了改变,而二聚体的洗脱曲线则没有变化,说明发生变化的是流体动力学半径而非次级相互作用.3)采用低流速时运行时间会更长,但可提高分离度,从而获得更可靠的聚集体定量结果.4)通过增加色谱柱长度可改善SEC分离度.
结论:任何SEC方法都必须进行充分评估以开发出最佳方法.与耗时的HP-SEC相比,使用UP-SEC能够在更短的时间内更加高效和可靠地预测方法优化结果.Auto·Blend Plus技术的使用也有助于更加轻松地系统性研究流动相对蛋白质结构以及次级相互作用的影响.
其他文献
如何把制度优势转化为治理效能是推进国家治理体系和治理能力现代化的重要课题.中国国家治理的独特之处在于“政党-政府-社会”的三维结构.作为国家治理领导性主体,中国共产
生物制药中治疗性重组蛋白几乎都是通过高效的宿主细胞表达,宿主细胞同时表达了大量自身蛋白可能对重组蛋白药物造成污染.目前常用的基于ELISA的HCP检测方法存在仅能对已知的
目的：采用离子交换高效液相色谱法(CEX-HPLC)分析单克隆抗体制品的电荷异质性.
方法 ：应用CEX-HPLC技术,对羧肽酶B(CpB)和N-糖苷酶F(PNGase)酶切前后的单抗制品进行电荷异
幸有青山埋忠骨──卞壶与卞壶墓吴阗南京朝天宫后山，有一座为历代官吏祭祀的墓地，这就是南京久负盛名的卞壶墓。卞壶（２８０－３２８），字望之，济阴冤句人（今山东曹县西北）。卞壶少有令名，西晋永嘉年
列宁曾经指出:“在市场上常常可以看到一种情况:那个叫喊得最凶的和发誓发得最厉害的人,正是希望把最坏的货物推销出去的人。”“四人帮”的文痞姚文元,在《论林彪反党集团
抗体-药物偶联物(Antibody Drug Conjugates,ADCs) 是近年来越来越受到重视的一类治疗性蛋白药物.ADCs结合了靶向型非常强的单克隆抗体和具有细胞毒性小分子药物,将其运
Jon Asgeir Johannesson一手建立了Baugur零售王国,现在这个王国毁灭了,成为本轮经济危机和冰岛国家破产的受害者Baugur总裁Jon Asgeir Johannesson于1989年在雷克雅未克开设
韩国设计师助推飞天大鸟升级版强力PK“山寨”货眼下,有关陆冬燕和她的智能飞天大鸟成为业内一大热议的话题。自本刊首次报道陆冬燕创业事迹以后,智能飞天大鸟持续火爆销售,
李、杏是原产我国的古老果树树种。栽培历史悠久,分布范围广,结果早,易丰产,果形美观,营养丰富,除供鲜食外尚可加工成多种果品,很受群众欢迎。辽宁省自然条件适宜于李、杏生