【摘 要】
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表观遗传学是研究无DNA序列变化、可遗传的基因表达的改变.表观遗传学包括DNA甲基化、组蛋白修饰、染色体重塑、遗传印记、X染色体失活等.DNA甲基化是表观遗传调控中的主
【机 构】
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吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室,长春 130021
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表观遗传学是研究无DNA序列变化、可遗传的基因表达的改变.表观遗传学包括DNA甲基化、组蛋白修饰、染色体重塑、遗传印记、X染色体失活等.DNA甲基化是表观遗传调控中的主要方式.研究发现,在哺乳动物细胞中DNA甲基化的异常改变,包括全基因组DNA低甲基化及肿瘤抑制基因启动子区CpG岛的DNA高甲基化与肿瘤的发生密切相关.因此,研究辐射致癌中DNA甲基化的改变,对于阐明辐射致癌机制将具有重要意义.目的：建立电离辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤动物模型.研究胸腺淋巴瘤细胞抑癌基因、癌基因DNA甲基化的改变.阐明DNA甲基化在辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤中的作用.方法：建立胸腺淋巴瘤动物模型：BALB/c小鼠,采用60Co治疗机照射,1.75 Gy/次,1次/周,连续照射4周,总剂量7.0 Gy,剂量率0.382Gy/min. 照射后6个月计算胸腺淋巴瘤发生率.BALB/c小鼠胸腺淋巴瘤发生率为58.51％ (55/94).DNA甲基化检测：采用硫化测序PCR(bisulfate-sequencing PCR,BSP)方法检测基因CpG岛DNA甲基化改变. 结果：采用BSP检测胸腺淋巴瘤细胞p16抑癌基因启动子区CpG岛DNA甲基化改变.结果显示,胸腺淋巴瘤细胞与正常胸腺细胞相比较,所检测的23个CpG位点中,第10及第1 1个CpG位点的DNA甲基化发生率均显著增高,具有统计学意义(分别P＜0.05,P＜0.01).采用BSP法对癌基因启动子区CpG岛DNA甲基化进行检测.结果发现,c-Myc基因在对照组中2个CpG位点发生DNA甲基化,而胸腺淋巴瘤组中未发现DNA甲基化位点.Kras基因在对照组中16个CpG位点发生了DNA甲基化,胸腺淋巴瘤组中12个CpG位点发生了DNA甲基化,与对照组相比DNA甲基化数量降低.Notch2基因在对照组中7个CpG位点发生了DNA甲基化,胸腺淋巴瘤组中5个CpG位点发生了DNA甲基化,与对照组相比DNA甲基化数量降低. 结论：以上结果提示,抑癌基因DNA高度甲基化,可能在电离辐射诱发胸腺淋巴瘤中起重要作用.同时,电离辐射可能通过促使癌基因启动子区CpG岛DNA去甲基化,从而启动癌基因的活化并导致其过度表达,在辐射致癌中发挥重要作用.
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