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采用RDP试剂提取杂色鲍Haliotis diversicolor不同免疫时相肝脏的总RNA，经olgotex试剂盒纯化得到mRNA。根据SMARTswitching mechanism at 5end of RNA transcript原理，利用含sfiIB酶切位点的oligodT引物合成cDNA第一条链，利用含SfiIA酶切位点的SMARTⅢ寡核苷酸核苷酸作为cDNA第一条链在mRNA5’端延伸出去的模板，采用LD-PCR引物合成双链cDNA。双链cDNA用sfi I酶切和过柱分级分离后，与λTripEx2两臂进行连接，随后进行λ噬茵体体外包装反应，构建成杂色鲍不同免疫时相12h和24h全长cDNA文库。构建好的文库分别含有约5.04×106和2.95×106个重组子。插入cDNA长度分布在500bp-3kb左右，说明文库具有良好的质量，为进一步筛选、克隆杂色鲍免疫调控基因奠定了基础。