【摘 要】
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本文以甜菜种子为研究对象,对经过高温高湿(40℃,RH100％)处理后的种子基因组DNA提取方法及DNA损伤的ISSR指纹图谱进行了比较研究.研究结果表明:在改良CTAB法基础上,用25∶ 24
【机 构】
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农业部糖料产品质量安全风险评估实验室,哈尔滨150080中国农业科学院甜菜研究所/黑龙江大学农作物研究院,哈尔滨150080;农业部甜菜品质监督检验测试中心/黑龙江大学,哈尔滨150080;
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本文以甜菜种子为研究对象,对经过高温高湿(40℃,RH100％)处理后的种子基因组DNA提取方法及DNA损伤的ISSR指纹图谱进行了比较研究.研究结果表明:在改良CTAB法基础上,用25∶ 24∶1的Tris饱和酚/氯仿/异戊醇抽提三次,并在提取出的DNA中加入1ml的RNA水解酶,用此方法提取甜菜干种子中的DNA纯度高、破损小、完整性好.此外,筛选出适合老化甜菜种子ISSR分子标记分析的5条引物即u824、u827、u834、u835、u857,并建立了甜菜种子老化处理后的ISSR特异性谱带.通过对谱带的分析发现DNA的损伤区域主要为高分子量(2000-750bP).随着种子老化程度的加深,ISSR条带减少,亮度变浅甚至消失.
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