HSP-FLP重组质粒的构建及表达分析

• 作 者: 屈永贵 陈婷芳 王静 王飞英 吴秀山 邓云
• 机 构: 湖南师范大学生命科学学院
• 出 处: 怀化学院学报
• 发表日期: 2014年5期
• 关键词: 斑马鱼 转基因 HSP FLP HSP FLP zebrafish transgenesis
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目“人类心脏和肌肉高水平表达基因POP1在心肌肥大中的作用研究”（81170088）,湖南省研究生创新性课题“利用斑马鱼模型研究Trim45基因在血祖细胞形成与分化中的作用”（CX20128212）.

为了制备用于在斑马鱼中热休克全身表达目的基因的转基因载体，通过分子克隆的方法从P ｛hsFLP｝86E/TM6B转基因果蝇的基因组中克隆出FLP.并同时对HSP-Wnt5A-EGFP载体进行改造， Wnt5A由FLP代替，并在FLP和EGFP编码区之间插入带有多克隆位点的IRES序列，获得pTol2-HSP-FLP-IRES-EGFP转基因表达载体.利用得到的转基因载体显微注射到斑马鱼单细胞期胚胎中进行表达分析，结果表明，经热激外源目的基因FLP和报告基因EGFP均能在斑马鱼中表达.pTol2-HSP-F