【摘 要】
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以马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗株(DLA-EIAV)感染细胞总DNA及其亲本强毒L株感染马外周血液白细胞中DNA为模板,应用PCR方法分段扩增出DLA-EIAV和L株前病毒,并将各段扩增
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨,150001
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以马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗株(DLA-EIAV)感染细胞总DNA及其亲本强毒L株感染马外周血液白细胞中DNA为模板,应用PCR方法分段扩增出DLA-EIAV和L株前病毒,并将各段扩增产物克隆后进行测序.根据国外发表的马传染性贫血病毒核苷酸序列,推导出DLA-EIAV和L株全基因组核苷酸序列,经比较分析,DLA-EIAV株前病毒基因组全长8266个碱基,EIAV L株前病毒基因组共有8235个碱基.DLA-EIAV株与其亲本L株和DA株核苷酸序列相比,同源率分别为97.0%和97.5%.DLA-EIAV株和L株相比,长末端重复序列(LTR,由U3,R,U5组成)、编码囊膜糖蛋白的基因env及ORF S2变异率很高,U3,R,U5,env及ORF S2核苷酸序列差异率分别达13.2%,7.5%,5.1%,2.7%和3.9%,env基因及ORF S2推导的氨基酸序列差异率分别为4.4%和8.8%.从EIAV高度变异的env各个毒株中鉴定出6个氨基酸序列保守区,并发现中国的EIAV强、弱毒增强子区有转录因子GATA结合一致序列.序列比较发现EIAV L比DLA株多2个N连接糖化位点.DLA-EIAV,L和DA株在ENH的主要差别是,DLA-EIAV株含有转录因子bHLH作用一致序列.另外,DLA-EIAV株TAR茎的起始部位发生了改变,形成一个尿嘧啶小泡.这些变异对EIAV毒力的影响有待进一步研究.
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