鸡痘病毒载体复制非必需片段优化及强启动子的筛选

• 作 者: 彭大新 刘秀梵
• 机 构: 扬州大学畜禽传染病农业部重点开放实验室
• 出 处: 农业生物技术学报
• 发表日期: 2000年2期
• 关键词: 鸡痘病毒 复制非必需片段 启动子 活性 fowlpox virus replicate nonessential fragments promoters
• 基金项目: 国家863计划项目!960332025,,江苏省应用基础研究!BJ95107,,江苏省自然科学基金!BK9706,,江苏省教委基金

以痘苗病毒启动子Ｐ７．５调控的β－半乳糖苷酶基因为检测基因，分别插入三个复制非必需片段构成重组质粒，脂本介导转染鸡痘病毒中国疫苗株２８２Ｅ４感染原代鸡胚成细胞（ＣＥＦ）单层，蓝斑选纯化病毒；将重组病毒感杂次代ＣＥＦ，收获细胞后制备提取物，检测其中的β－半乳糖苷酶的活性，由此得到一个基因表达效率高的复制非必需片段ｐＦＰＶ７ｓ。根据痘苗病毒天然启动子Ｐ７．５的结构，人工合成４条寡核苷酸，形成一个早期和