基质金属蛋白酶组织抑制剂-2基因转染对平滑肌细胞的影响

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目的 探讨基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-2基因对体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞(SMCs)增殖和迁移能力的影响.方法利用重组腺病毒载体,将目的基因导入宿主细胞,建立转基因细胞株.应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联吸附试验(ELISA)检测TIMP-2表达.同时应用细胞直接计数法和侵袭小室研究转染细胞体外增殖和侵袭情况.结果转染TIMP-2基因的平滑肌细胞基因组中存在有590 bp目的基因特异性片断,TIMP-2蛋白在转染后平滑肌细胞中获得稳定表达和分泌.转染后平滑肌细胞生长受到明显抑制.AdhTIMP-2组透过人工基底膜的细胞数为21.38±12.81,与正常对照组和AdCMV组(53.64±11.27,44.23±12.75)比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论重组腺病毒载体介导TIMP-2基因转染对体外生长主动脉平滑肌细胞增殖和侵袭有明显抑制作用。

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