罗曼鸡白细胞介素18基因的克隆、表达及生物学活性检测

• 作 者: 陈红英 崔沛 崔保安 胡功政 朱前磊 王子馨
• 机 构: 河南农业大学牧医工程学院,河南省动物疫病预防控制中心
• 出 处: 四川农业大学学报
• 发表日期: 2009年2期
• 关键词: 鸡IL-18 克隆 原核表达 活性检测 chicken IL--18 eloning prokaryotic expression activity de
• 基金项目: 基金项目：国家“十一五”科技支撑计划专项（2006BAD06A08）.

应用RT-PCR技术从罗曼鸡脾淋巴细胞RNA中扩增鸡白细胞介素18（ChIL-18）~基因，并克隆和测序。结果表明，获得了ChIL-18全序列，其大小为597bp。将其成熟蛋白基因（510bp）亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中，转化大肠杆菌BL21（DE3），在IPTG的诱导下表达融合蛋白（GST-ChIL-18）。SDS-PAGE可检测到分子质量为约46kDa的融合蛋白，Westernblot证实该融合蛋白可与鼠抗鸡IL-18单克隆抗体发生特异性反应。用MTT法测定表明，重组蛋白能明显促进鸡T细