【摘 要】
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目的通过研究基质细胞衍生因子-1(stromal derived factor-1,SDF-1)对小鼠关节软骨细胞自噬的影响,探讨SDF-1在骨性关节炎中的作用及机制。方法分离并体外培养小鼠关节软骨细
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科;
【基金项目】
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国家自然科学基金(81472082,81572094)
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目的通过研究基质细胞衍生因子-1(stromal derived factor-1,SDF-1)对小鼠关节软骨细胞自噬的影响,探讨SDF-1在骨性关节炎中的作用及机制。方法分离并体外培养小鼠关节软骨细胞,分别予以0、1、10、100、1 000μg/L浓度的五组重组SDF-1蛋白干预24 h。运用RT-PCR检测各组细胞的微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)和UNC-51样激酶复合物1(uncoordinated-51 like kinase 1,ULK1)m RNA表达情况,运用Western Blot方法检测LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ、ULK1及泛素连接蛋白62(ubiquitin-binding protein p62,p62)蛋白表达水平,通过透射电镜观察自噬溶酶体。结果 RT-PCR结果显示10、100、1 000μg/L浓度条件下LC3、ULK1的m RNA水平明显高于对照组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。Western Blot结果显示1、10、100、1 000μg/L的各组细胞的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、ULK-1表达水平较对照组升高,p62蛋白表达水平较对照组明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。透射电镜结果显示经SDF-1干预后,自噬溶酶体较对照组增多,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 SDF-1可诱导小鼠关节软骨细胞自噬的发生,SDF-1可能通过调节软骨细胞自噬水平参与了骨性关节炎的进展。
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