【摘 要】
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目的:通过观察雷帕霉素对PAN诱导的足细胞损伤及自噬相关蛋白表达的影响,探讨自噬在雷帕霉素保护PAN诱导的足细胞损伤中的作用及可能机制。方法:构建PAN诱导的足细胞损伤模型
【机 构】
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浙江大学校医院紫金港校区,浙江省人民医院
【基金项目】
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浙江医药卫生科技一般项目(2015KYA025);浙江省中医药管理局项目(2016ZA023)资助
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目的:通过观察雷帕霉素对PAN诱导的足细胞损伤及自噬相关蛋白表达的影响,探讨自噬在雷帕霉素保护PAN诱导的足细胞损伤中的作用及可能机制。方法:构建PAN诱导的足细胞损伤模型,将足细胞分成对照组(Control组),PAN组(加入50μg/ml PAN),雷帕霉素组(RAP组:分别加入100、200、300 ng/ml雷帕霉素),PAN+雷帕霉素组(PAN+RAP组:细胞在用含PAN的培养液培养前1 h,分别用100、200、300 ng/ml雷帕霉素进行预处理1 h)。采用Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡,透射电镜观察自噬小体,Western blot检测LC3、p62、4EBP1、P70S6K、m TOR蛋白表达。结果:与对照组比较,PAN组足细胞凋亡增加,自噬体减少,LC3Ⅱ蛋白表达下调,p62上调,m TOR、4EBP1、P70S6K磷酸化水平上调;与PAN组比较,PAN+RAP组足细胞凋亡率下降,自噬体增加,LC3Ⅱ蛋白表达上调,p62下调,m TOR、4EBP1、P70S6K磷酸化水平下调。结论:PAN可以抑制足细胞自噬,促进足细胞凋亡;雷帕霉素可通过激活自噬改善PAN诱导的足细胞损伤,这种作用可能与雷帕霉素抑制m TOR/4EBP1、P70S6K信号通路有关。
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