【摘 要】
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背景:细胞外基质来源的生物材料在组织工程再生领域应用广泛,近年来生物材料对巨噬细胞表型极化作用受到极大关注.目的:探究脱细胞软骨基质(decellularized cartilage extrac
【机 构】
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解放军医学院,北京市 100853;中国人民解放军第一医学中心骨科研究所,骨科再生医学北京市重点实验室,全军骨科战创伤重点实验室,北京市 100853;南开大学医学院,天津市 300071
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背景:细胞外基质来源的生物材料在组织工程再生领域应用广泛,近年来生物材料对巨噬细胞表型极化作用受到极大关注.目的:探究脱细胞软骨基质(decellularized cartilage extracellular matrix,DCM)及胃蛋白酶处理脱细胞软骨基质(pepsin treated decellularized cartilage extracellular matrix,PDCM)对巨噬细胞表型极化的调控作用.方法:采用物理粉碎、反复冻融及差速离心方法制备猪关节软骨脱细胞软骨基质(DCM),溶解于胃蛋白酶溶液内得到其生物降解产物(PDCM).将小鼠巨噬细胞系RAW264.7分5组培养:对照组加入巨噬细胞完全培养基,M1型阳性对照组加入含脂多糖+干扰素γ的完全培养基,M2型阳性对照组加入含白细胞介素4的完全培养基,PDCM组加入含PDCM的完全培养基,胃蛋白酶组加入含胃蛋白酶的完全培养基,培养18 h后进行CD86(M1型巨噬细胞)、CD206(M2型巨噬细胞)免疫荧光染色鉴定.另外将小鼠巨噬细胞系RAW264.7分6组培养:对照组、M1型阳性对照组、M2型阳性对照组、胃蛋白酶组、DCM涂布组与PDCM涂布组,培养24 h后进行CD86、CD206流式细胞术检测.结果 与结论:①免疫荧光结果显示,PDCM组诱导巨噬细胞CD86表达阳性比约为0.13,诱导巨噬细胞CD206表达阳性比约为0.5;②流式细胞术检测结果显示,DCM诱导巨噬细胞表达CD86(20.1％)及CD206(28.8％),PDCM只诱导巨噬细胞表达CD206(23.2％);③结果 表明,DCM及其生物降解产物PDCM具有促进巨噬细胞M2型极化的作用.
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