目的 观察不同病程糖尿病小鼠皮肤组织晚期糖基化终末产物(AGE)的表达及其对胶原纤维的影响.方法 健康8周龄C57BL/6J雄性小鼠采用小剂量链佐星(50 mg/kg)多次注射法建立糖尿病模型,分别在造模后第4周和12周处死小鼠,取背部中央皮肤,HE染色观察组织学结构,样本碱水解法测定羟脯氨酸水平反映胶原总量,限制性胃蛋白酶降解法测定胶原交联程度,实时定量PCR法测定Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原基因表达,荧光分光光度法和Western印迹检测晚期糖基化终末产物水平,硫代巴比妥酸法测定丙二醛含量.统计学分析采用t检验.结果 镜下可见糖尿病小鼠皮肤组织明显变薄,胶原呈进行性减少.第4周和12周时,糖尿病组小鼠皮肤组织羟脯氨酸含量与正常对照组比较显著降低[(684.5±76.7)比(787.7±87.7) mg/g,(558.1±73.1)比(757.8±75.3) mg/g,均P＜ 0.01],皮肤AGE水平显著上升[(37.47±10.65)比(26.39±3.74)AUF/mg羟脯氨酸,(47.70±5.66)比(29.91±6.50) AUF/mg羟脯氨酸,均P＜ 0.01],丙二醛含量显著增加[(6.62±0.47)比(4.82±0.56) μmol/L,(8.63±0.36)比(5.15±0.46)μmol/L,均P＜ 0.01],交联胶原以及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达均下降(P＜0.01或0.05),糖尿病12周组非交联胶原亦明显下降(P＜0.05);与糖尿病4周组相比,糖尿病12周组小鼠皮肤羟脯氨酸含量、Ⅰ型胶原表达进一步减少(P＜0.05),AGE和丙二醛水平进一步增加(P＜0.01).结论 糖尿病小鼠皮肤组织胶原纤维性状发生改变,可能与皮肤组织中晚期糖基化终末产物水平上升及氧化损伤加剧有关。
糖尿病小鼠皮肤组织中晚期糖基化终末产物的表达及其对胶原纤维的影响
【摘 要】
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目的 观察不同病程糖尿病小鼠皮肤组织晚期糖基化终末产物(AGE)的表达及其对胶原纤维的影响.方法 健康8周龄C57BL/6J雄性小鼠采用小剂量链佐星(50 mg/kg)多次注射法建立糖尿病模型,分别在造模后第4周和12周处死小鼠,取背部中央皮肤,HE染色观察组织学结构,样本碱水解法测定羟脯氨酸水平反映胶原总量,限制性胃蛋白酶降解法测定胶原交联程度,实时定量PCR法测定Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原基因表达,荧
【机 构】
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226001江苏,南通大学附属医院皮肤性病科,南通大学药学院药理学系,226001江苏,南通大学附属医院皮肤性病科,226001江苏,南通大学附属医院皮肤性病科
【出 处】
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中华皮肤科杂志
【发表日期】
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2014年47期
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