【摘 要】
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目的观察小干扰RNA(siRNA)沉默Kruppel样转录因子8(KLF8)基因对胃癌细胞MKN-28增殖及侵袭能力的影响。方法构建针对KLF8的小干扰RNA(si-KLF8),应用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot技术检测转染后胃癌细胞中KLF8 m RNA和蛋白的表达,应用噻唑蓝(MTT)比色法检测转染24、48、72 h的细胞增殖能力的变化,应用Tr
【机 构】
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目的观察小干扰RNA(siRNA)沉默Kruppel样转录因子8(KLF8)基因对胃癌细胞MKN-28增殖及侵袭能力的影响。
方法构建针对KLF8的小干扰RNA(si-KLF8),应用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot技术检测转染后胃癌细胞中KLF8 m RNA和蛋白的表达,应用噻唑蓝(MTT)比色法检测转染24、48、72 h的细胞增殖能力的变化,应用Transwell小室实验检测转染48 h后胃癌细胞侵袭能力的变化。
结果si-KLF8和阴性对照siRNA(si-CTRL)成功转染至胃癌细胞;si-KLF8组KLF8 m RNA和蛋白的表达量明显低于阴性对照组和正常对照组(P< 0. 05);si-KLF8组增殖能力下降,24、48、72 h的吸光度值分别为0. 125±0. 003、0. 193± 0. 005、0. 223±0. 005、0. 267±0. 003、0. 315±0. 006,穿膜细胞数为(42. 0±3. 6)个,均明显低于阴性对照组和正常对照组(P<0. 05);阴性对照组和正常对照组比较,上述指标差异无统计学意义(P> 0. 05)。
结论si-KLF8可抑制人胃癌细胞的增殖和侵袭能力,提示KLF8在胃癌的发生发展过程中发挥着重要的作用。
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