牛病毒性腹泻病毒基因组cDNA文库的构建

来源 :中国病毒学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zhangqi789

【摘要】

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以牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）┥ｎＬ株的基因组ＲＮＡ为模板，经逆向转录酶作用，合成第一链ｃＤＮＡ，再以ＲＮａｄｓｅ／Ｈ与ＤＮＡ聚合酶Ｉ联合作用合成ｄｓｃＤＮＡ，并以ｄＣ同聚物尾化。ｐＵＣ８ＤＮＡ在ＰｓｔＩ酶解后，以ｄＧ同聚物尾化，两者退火构成重组质粒，转化到Ｅ．ｃｏｌｉＪＭ１０１受体菌中

【作者】

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糜克永王蔷朱勇任向远杨玉莹

【机构】

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中国科学院武汉病毒研究所,内蒙古畜牧科学院

【出处】

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中国病毒学

【发表日期】

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1995年2期

【关键词】

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牛病毒性腹泻病毒 CDNA文库基因组 BVDV Reverse transcription Gene cloning cDNA library

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以牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）┥ｎＬ株的基因组ＲＮＡ为模板，经逆向转录酶作用，合成第一链ｃＤＮＡ，再以ＲＮａｄｓｅ／Ｈ与ＤＮＡ聚合酶Ｉ联合作用合成ｄｓｃＤＮＡ，并以ｄＣ同聚物尾化。ｐＵＣ８ＤＮＡ在ＰｓｔＩ酶解后，以ｄＧ同聚物尾化，两者退火构成重组质粒，转化到Ｅ．ｃｏｌｉＪＭ１０１受体菌中，另以γ－＾３２Ｐ－ＡＴＰ标记ＢＶＤＶＲＮＡ制备探针，通过菌落原位杂交筛选重组子。酶切分配表明重组质粒插入

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