【摘 要】
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通过筛选拟南芥cDNA文库结合RACE的方法, 克隆了一个全长cDNA--AtCBK1. Northern杂交和mRNA原位分析表明该基因在生长旺盛的部位和维管组织中大量表达. 利用昆虫细胞表达系统
【机 构】
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武汉大学生命科学学院植物发育生物学教育部重点实验室
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通过筛选拟南芥cDNA文库结合RACE的方法, 克隆了一个全长cDNA--AtCBK1. Northern杂交和mRNA原位分析表明该基因在生长旺盛的部位和维管组织中大量表达. 利用昆虫细胞表达系统, 表达并纯化了重组蛋白AtCBK1, 钙调素结合实验和自磷酸化、底物磷酸化分析直接证明了其酶活性受钙/钙调素调控, 毛细管电泳检测其自磷酸化氨基酸为苏氨酸. 系统进化分析推测AtCBK1可能来源于一个古老的CRK, 与动物的CaMK在进化上可能来自不同的祖先.结果充分说明AtCBK1编码一个拟南芥中全新类型的
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