【摘 要】
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特定启动子的绝对定量蛋白表达量测定在分子生物学及合成生物学领域具有重要的意义。启动子强度一般由该启动子表达荧光蛋白的荧光强度表示。然而,对于特定启动子的绝对定量
【机 构】
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West China Medical Center Team for International Genetically Engineered Machine Competition 2017,Wes
【基金项目】
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中央高校基本科研业务费专项资金;国家自然科学基金(81502966);国家级大学生创新创业训练计划(201710611744)资助;华西临床医学院;华西医院;生物治疗国家重点实验室给予的支持~~
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特定启动子的绝对定量蛋白表达量测定在分子生物学及合成生物学领域具有重要的意义。启动子强度一般由该启动子表达荧光蛋白的荧光强度表示。然而,对于特定启动子的绝对定量蛋白表达量测定方法目前仍不尽如人意。不同蛋白编码序列对启动子表达水平的影响及现有测定绝对定量蛋白表达量方法的复杂性,均为绝对定量蛋白表达量测定带来了挑战。我们在这里介绍了一种利用隔离子RiboJ和标准荧光曲线快速测定绝对定量蛋白表达量的方法,并通过模型对该方法进行了验证。使用这种方法,我们成功测定了Anderson启动子家族中9种组成型启动子的强度。本方法为代谢通路设计提供了更准确的数据,并为不同启动子强度的标准化提供了一种直接的方案。
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