重组酶Cre的逆转录病毒载体的构建及鉴定

• 作 者: 陆群 吴补领 张洪伟 王冀姝 韩骅 余擎 苏凌云
• 机 构: 第四军医大学,第四军医大学,基础部遗传学与发育生物学教研室
• 出 处: 第四军医大学学报
• 发表日期: 2002年5期
• 关键词: 重组酶Cre 基因剔除 逆转录病毒 遗传载体 体外感染 recombination genetic gene knockoutretrovirus genet
• 基金项目: 全国高等学校骨干教师资助计划

目的构建表达重组酶Cre的逆转录病毒载体并进行初步的体外感染研究. 方法将Cre基因片段插入到逆转录病毒载体pMx-IRES-GFP中,转染包装细胞系获得表达Cre的病毒颗粒,体外感染NIH-3T3细胞,通过绿色荧光蛋白GFP 测定病毒滴度. 结果构建了表达Cre的逆转录病毒载体pMx-IRES-GFP-Cre. 通过包装细胞系得到的含有病毒颗粒的培养上清,这种培养上清具有体外感染细胞的能力,病毒滴度为105 cfu*mL-1. 结论用逆转录病毒体系表达重组酶Cre并能有效地进行体外感染. 为用这一方法在