农杆菌介导转化法构建转CTV—cp的枳壳植株

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目的:采用农杆菌介导法,将能抑制病毒侵染的外壳蛋白基因转入枳壳,为通过基因转化进行枳壳的抗病育种提供依据和方法。方法:以枳壳实生苗上胚轴为材料,农杆菌菌株为EHA101,含有质粒载体pGA482GG。质粒上插入了35 s启动子驱动的外源目的基因——柑桔衰退病病毒外壳蛋白基因(CTV-cp)及GUS,NPTⅡ基因。结果:枳壳转化试验中,抗菌素采用头孢霉素较好,浓度为300 mg*L-1;以卡那霉素作为选择试剂,浓度为50 mg*L-1;转化获得的抗性植株,GUS检测结果,70.0%的植株呈阳性反应;Sout
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