【摘 要】
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本项目旨在探索比较生后2、6及10周SD大鼠腓肠肌、比目鱼肌卫星细胞原代和传代培养的差异。取生后2、6及10周大鼠后肢腓肠肌、比目鱼肌,采用组织块法原代培养与传2代及差速贴
【基金项目】
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南通大学名师工程培育项目[03080542];南通大学博士点建设专项[05024276]
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本项目旨在探索比较生后2、6及10周SD大鼠腓肠肌、比目鱼肌卫星细胞原代和传代培养的差异。取生后2、6及10周大鼠后肢腓肠肌、比目鱼肌,采用组织块法原代培养与传2代及差速贴壁,应用MTT法、DAPI荧光、免疫荧光细胞化学、NADH-TR酶组化及SDS-PAGE电泳检测。结果表明:分离纯化的各周龄组腓肠肌快肌卫星细胞和比目鱼肌慢肌卫星细胞纯度达到95%以上,采用Desmin、Fast-myosin、Slow-myosin抗体分别鉴定,细胞生长速度以快肌卫星细胞大于慢肌卫星细胞,周龄以2周>6周>10周。NADH-TR酶组化确定腓肠肌分成IIA、IID(IIX)、IIB及I型纤维,以速度与力量为主;而比目鱼肌仅有IIA、IID及I型纤维,没有IIB型纤维,以耐力见长。肌球蛋白重链异构体电泳IIa、IId(IIx)、IIb及I型和IIa、IId(IIx)及I型也分别佐证该结果。本实验结果提示大鼠快肌卫星细胞和周龄年幼的生长速度快于慢肌卫星细胞和周龄年长的,快肌以速度和力量为著,慢肌以耐力为主。
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