【摘 要】
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目的 探究青藤碱(sinomenine,SIN)对人乳腺癌MCF-7细胞他莫昔芬(tamoxifen,TAM)耐药的逆转作用及相关机制.方法 采用高剂量短时间刺激诱导法构建MCF-7/TAM耐药株,并通过MTT法
【机 构】
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中国科学院大学宁波华美医院,浙江宁波315010;杭州市富阳区中医院,杭州311400
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目的 探究青藤碱(sinomenine,SIN)对人乳腺癌MCF-7细胞他莫昔芬(tamoxifen,TAM)耐药的逆转作用及相关机制.方法 采用高剂量短时间刺激诱导法构建MCF-7/TAM耐药株,并通过MTT法验证细胞耐药性的改变,进一步采用MTT法检测SIN和TAM对MCF-7/TAM细胞的增殖抑制作用,并采用CompuSyn软件评估两者的联合效应.流式细胞术检测SIN和TAM对MCF-7/TAM细胞凋亡和周期的影响,Western blotting检测SIN对MCF-7/TAM细胞中PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响.结果 MCF-7/TAM细胞对TAM敏感性显著降低,已产生耐药性;SIN和TAM单用均能够抑制MCF-7/TAM细胞的增殖,TAM和SIN联合使用对MCF-7/TAM细胞的抑制作用显著增强,经CompuSyn软件分析显示两药具有协同作用;SIN和TAM联用能够更显著地诱导MCF-7/TAM细胞凋亡和阻滞细胞周期;MCF-7/TAM细胞中PI3K、Akt和mTOR的磷酸化水平显著高于MCF-7细胞,SIN干预后MCF-7/TAM细胞中PI3K、Akt和mTOR的磷酸化水平显著下降.结论 SIN能够通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路,从而逆转MCF-7细胞对TAM耐药.
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