桉树无性系叶片蛋白质组双向电泳体系优化

• 作 者: 马松亚 蒋维昕 屈林丰 曹雪宁 谭玲 杨梅
• 机 构: 广西大学林学院,广西林业科学与工程高校重点实验室
• 出 处: 中南林业科技大学学报
• 发表日期: 2016年4期
• 关键词: 桉树 叶片 蛋白质组 无性系 双向电泳 Eucalyptus leaves Proteome clones two-dimensional gel el

为了建立适用于桉树叶片蛋白质组研究的双向电泳体系，以尾叶桉Eucalyptus urophyllas广林4号无性系作为试验材料，对蛋白质样品获取方法、双向电泳等电聚焦胶条pH范围、蛋白质上样量、胶条平衡条件以及染色方法进行了优化。结果表明：提取液＋酚抽提法最适合桉树叶蛋白质的提取，电泳图谱可检测到850个蛋白质点。7mol／L尿素＋2mol/L硫脲＋4％Chaps＋60mmol DTT 10μL的蛋白质干粉裂解液，裂解效果较好；使用50mg蛋白质干粉和600μL裂解液所获得的蛋白质浓度较高，为3．97μg