酪氨酸硫化修饰对酪氨酸硫化转移酶活性的调节

• 作 者: 高金明 冯起平 左瑾 方福德 蒋磊 郭子健
• 机 构: 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院呼吸内科,中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所分子生物学同家重点实验室
• 出 处: 中国医学科学院学报
• 发表日期: 2007年2期
• 关键词: 硫化 酪氨酸 酪氨酸硫化转移酶 sulfation tyrosine tyrosylprotein sulfotransferase
• 基金项目: 国家自然科学基金（30470767,30471930）、北京自然科学基金（7072063）、留学归国人员启动基金和北京协和医院青年基金

目的研究酪氨酸硫化修饰对酪氨酸硫化转移酶（TPST）1和TPST2的调节作用。方法以人cDNA为模板,采用聚合酶链反应方法扩增人TPST1和TPST2基因野生型的全长cDNA序列,并融合入人IgG1的Fc编码区域;采用定点突变方法将TPST1和TPST2蛋白中可硫化的酪氨酸突变为苯丙氨酸。针对TPST1（259～275位核苷酸）和TPST2（73～94位核苷酸）基因,分别构建小干扰RNA（shRNA）1和shRNA2重组质粒。测定所有构建质粒开放读框序列。证实序列正确后,将上述质粒分别转染人肾胚胎上皮细胞