局部淋巴结改良法在化妆品皮肤刺激性和致敏性检测中的应用

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目的探讨小鼠局部淋巴结三磷酸腺苷检测法(LLNA:DA)检测化妆品原料及产品的皮肤刺激性和致敏性。方法选取已知特性的4种化妆品原料(邻苯二甲酸酐、丁香酚、硫酸和水杨酸甲酯)以及未知特性的6种化妆品产品(编号1-6),选耳厚差、耳重为刺激指标,淋巴结重量、淋巴细胞数和ATP发光值为致敏指标进行以下实验:Balb/c小鼠4次重复染毒后分离耳后淋巴结并制成单细胞悬液,经ATP试剂盒处理后于多功能酶标仪上测定ATP发光值,根据刺激指标值分别计算刺激指数(SI1、SI2和SI3),根据SI3计算有效浓度(EC1.8)值。结果 2.5%以上的硫酸和4号化妆品可引起耳厚差和耳重的增加,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),可能判为刺激物,其余均无刺激性。邻苯二甲酸酐、丁香酚和1号化妆品致敏检测阳性,其余无致敏性。两个刺激指标中耳重敏感度较高,三个致敏指标中ATP发光值和淋巴细胞计数敏感度较高。结论刺激指标和致敏指标结合可对化妆品刺激性和致敏性做出较好评价,有望成为化妆品刺激性和致敏性安全性评价的动物替代方法。
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