慢病毒载体对HIF-2α基因沉默效率的研究

• 作 者: 唐敏 熊晶
• 机 构: 永州市妇幼保健院妇科,中南大学湘雅二医院妇产科
• 出 处: 中南医学科学杂志
• 发表日期: 2012年3期
• 关键词: HIF-2α基因 慢病毒载体 RNA干扰 HIF-2α gene slow virus vector RNA interference

目的构建有效抑制HIF-2α基因表达的siRNA序列，并找到最佳病毒载体浓度。方法设计针对HIF-2α mRNA作用的4条siRNA的序列，分别插入慢病毒载体中，获得较高滴度的慢病毒后，运用RT-PCR和Werstemblot方法检测HIF-2αmRNA及蛋白质水平，筛选出对HIF-2α基因沉默作用较强的干扰序列及病毒载体剂量。结果4条siRNA序列均能干扰HIF-2α基因表达，其中KD2序列对HIF-2仪基因的干扰作用最强（P〈0．05）。两种不同剂量的慢病毒载体比较，高剂量慢病毒载体的干扰效果更明显（