游动放线菌中orf20基因敲除对雷莫拉宁合成的影响

• 作 者: 苏敏 邵雷 刘爱娟 林慧敏 陈代杰 李继安
• 机 构: 华东理工大学生物工程学院,上海医药工业研究院创新药物与制药工艺国家重点实验室
• 出 处: 工业微生物
• 发表日期: 2011年4期
• 关键词: 雷莫拉宁 基因敲除 同源重组 卤化酶 rarnoplanin gene knockout homologous recombination halogen
• 基金项目: 基金项目：”重大新药创制”科技重大专项（No.2009ZX09301-007）,国家科技支撑计划（No.2008BA163801）,国家自然科学基金（No.30772678）.

雷莫拉宁生物合成基因簇中off20与已知的卤化酶基因高度同源。本研究在大肠杆菌中构建同框敲除质粒pSM-3，将其转入游动放线茵[e-mail]33076，通过同源重组双交换的方法将orf20基因内部编码64个氨基酸的序列敲除，筛选得到双交换阻断突变株SIPI—A．2001doff20（△orf20）。经发酵验证，该突变株发酵产物中没有检测到雷莫拉宁产生。推测该酶可能是雷莫拉宁生物合成途径中的一个关键酶，除卤化功能外，可能还有其它相关的功能。