【摘 要】
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[目的]旨在研究PRMT5沉默与TSA处理抑制组蛋白去乙酰化酶(HDAC)的活性对人肝癌HepG2细胞中Klf4基因表达的影响.[方法]采取siRNA转染HepG2细胞的方法沉默PRMT5,TSA处理抑制HDA
【机 构】
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河南科技大学医学遗传学教研室,河南洛阳471000;南京医科大学医学遗传学系,江苏南京211166
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[目的]旨在研究PRMT5沉默与TSA处理抑制组蛋白去乙酰化酶(HDAC)的活性对人肝癌HepG2细胞中Klf4基因表达的影响.[方法]采取siRNA转染HepG2细胞的方法沉默PRMT5,TSA处理抑制HDAC,通过RT-PCR、lucif-erase assay、Western Blotting检测PRMT5沉默和TSA处理对Klf4表达的影响.[结果]在HepG2细胞中转染的三组PRMT5 siRNA均能有效干扰PRMT5的表达,其中siPRMT5-1对于PRMT5 mRNA和蛋白的干扰效果最好.TSA处理细胞后,组蛋白乙酰化修饰H3K9ac增加,HDAC3mRNA和PRMT5 mRNA表达下降,PRMT5和HDAC1蛋白表达下降.RT-PCR、luciferase assay、Western Blotting结果显示单独沉默PRMT5或用TSA处理细胞,Klf4的转录被激活,而沉默PRMT5的同时用TSA处理细胞对Klf4转录的促进作用更为明显.[结论]PRMT5沉默或TSA处理都能促进Klf4的转录,同时沉默PRMT5和用TSA处理对Klf4的转录激活更强烈,说明PRMT5和HDAC能够协同调控Klf4的转录.
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