【摘 要】
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目的 建立应用流式细胞术检测人/山羊嵌合体中人源细胞的方法.方法 通过宫内移植的方法将标记有绿色荧光蛋白(GFP)的人造血于/祖细胞(MIG细胞)移植入胎山羊腹腔内,从而获得人/山羊嵌合体模型(MIG羊).采集MIG羊的外周血,以数十种鼠抗人的抗体标记,筛选出对人源细胞特异性强而与山羊细胞无或仅有微弱交叉反应的抗体,列人流式细胞仪常规检测的首选抗体,继而在非移植山羊的外周血中加入不同比例(25%、
【机 构】
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200040,上海交通大学医学院附属上海市儿童医院上海医学遗传研究所,200040,上海交通大学医学院附属上海市儿童医院上海医学遗传研究所,200040,上海交通大学医学院附属上海市儿童医院上海医学遗
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目的 建立应用流式细胞术检测人/山羊嵌合体中人源细胞的方法.方法 通过宫内移植的方法将标记有绿色荧光蛋白(GFP)的人造血于/祖细胞(MIG细胞)移植入胎山羊腹腔内,从而获得人/山羊嵌合体模型(MIG羊).采集MIG羊的外周血,以数十种鼠抗人的抗体标记,筛选出对人源细胞特异性强而与山羊细胞无或仅有微弱交叉反应的抗体,列人流式细胞仪常规检测的首选抗体,继而在非移植山羊的外周血中加入不同比例(25%、50%、75%和100%)的人脐血细胞,用CD+34表面抗体标记来观察人脐血细胞和人CD+34细胞的分布,以决定"门"的区域和大小;取MIG羊的肝脏,应用流式细胞术检测灌流后肝实质细胞中GFP细胞的比例及DNA含量.结果 筛选出CD7、CD15、CD38、CD45CD20CD34CD14和血型糖蛋白A(GPA)等8种单抗作为检测嵌合体中人源细胞的首选抗体;确定了进行流式细胞分析时"门"的大小和区域;MIG羊肝实质细胞中,GFP+细胞的比例为29.1%(29 100/100 000);DNA含量测定结果显示MIG羊肝组织分选获得的GFP+细胞主要呈现2个峰,其位置与人的双峰位置相对应.结论 流式细胞术是研究干细胞在体内分化、归巢和生物学特征的快速、简便、有效的方法;表面抗体以及"门"的选择对于准确检测人/山羊嵌合体中人源细胞至关重要。
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在革兰阴性肠杆菌中,国内有关大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌B内酰胺酶耐药基因已有较多报道[1-5],但志贺菌属产β内酰胺酶耐药基因的报道鲜见[6].我们对20株志贺菌属进行9种β内酰胺酶基因(TEM、SHV、CARB、LAP、GES、PER、VEB、CTX-M-1群、OXA-1群)检测,经测序和BLASTn比对发现CTX-M-55型,报告如下。
由中华医学会中华检验医学杂志编辑委员会主办、中国医科大学第一附属医院承办的首届中国病毒性肝炎和艾滋病实验室诊断与临床高峰论坛于2008年3月28-29日在沈阳辽宁大厦召开.来自全国各地的特邀代表、检验仪器及试剂生产厂商代表150余人出席了本次论坛.开幕式由卫生部临床检验中心主任申子瑜教授主持,中华医学会检验分会主任委员、中华医学杂志总编辑丛玉隆教授致开幕辞,中华医学会杂志社袁桂清副社长出席了会议并
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对肠杆菌科细菌具有最强活性的β内酰胺类药物是碳青霉烯类药物,在治疗产AmpC酶和(或)超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的肠杆菌引起的感染时,碳青霉烯类药物一直是首选药物。