G250抗原肽与HBcAg融合基因原核表达载体的构建及表达蛋白的免疫分析

• 作 者: 刘波 孙泽强 刘庆勇 陈杰 王司军 杨广笑 王全颖
• 机 构: 山东大学医学院,山东大学附属济南市中心医院泌尿外科,西安华广生物工程公司
• 出 处: 西安交通大学学报(医学版)
• 发表日期: 2014年1期
• 关键词: 融合蛋白 G250 HBCAG 免疫原性 肾癌 fusion protein G250 HBcAg immunogenicity renal car

目的构建肾癌G250抗原肽与HBcAg重组基因的原核表达质粒pET28a（＋）／C—G250肽-C，并通过大肠杆菌进行原核表达并纯化，分析表达融合蛋白的免疫原性及抗原性。方法PCR扩增编码G250抗原中249～268氨基酸的基因片段，将G250肽插入去除主要免疫优势区的重组质粒pGEMEX／HBcAg中，获得重组质粒pGEMEX／C—G250肽-C，为更换酶切位点，以pGEMEX／C—G250肽-C为模板，PCR扩增C—G250肽一C基因片段，最终将目的基因亚克隆入原核表达质粒pET28a（＋）中，IPT