大鼠脑胶质瘤荧光素酶动物模型建模细胞株C6-Luc的构建

• 作 者: 黄伟 吕明 李保卫 王玉丽 邵荣光 高钟镐
• 机 构: 中国医学科学院&,北京协和医学院药物研究所,医药生物技术研究所,延边大学药学院,军事医学科学院毒物药物研究所
• 出 处: 解放军医学杂志
• 发表日期: 2011年1期
• 关键词: 荧光素酶类 萤火虫 生物发光成像 神经胶质瘤 模型 动物 luciferases firefly bioluminescence imaging glio

目的构建稳定表达萤火虫荧光素酶的大鼠脑胶质瘤细胞株C6-Luc。方法通过浓度梯度法测定C6大鼠脑胶质瘤细胞的潮霉素最佳筛选浓度。使用FuGENEHD转染试剂将表达荧光素酶的真核质粒pGL4.50转染至C6细胞,应用潮霉素筛选多克隆细胞株,进一步采用有限稀释法筛选单克隆细胞株。采用报告基因分析对单克隆细胞株进行阳性鉴定,并考察荧光素酶在阳性克隆中表达的稳定性。对阳性克隆进行体外生物发光检测,确定最小细胞检测量,并采用线性回归分析生物发光强度与细胞数量的相关性。将阳性克隆细胞种植于Wistar大鼠脑部,应用