【摘 要】
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目的 探究LncRNA PVT1靶向调控Sgl基因在肾细胞癌侵袭和凋亡的机制,以期为临床上肾癌的治疗提供新的靶点.方法 选择2015年12月至2018年12月本院收治的58例肾细胞癌患者为研究
【机 构】
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解放军联勤保障部队第960医院泌尿外科,济南 250000
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目的 探究LncRNA PVT1靶向调控Sgl基因在肾细胞癌侵袭和凋亡的机制,以期为临床上肾癌的治疗提供新的靶点.方法 选择2015年12月至2018年12月本院收治的58例肾细胞癌患者为研究对象,术中收集患者的肿瘤组织和癌旁组织.利用GEO数据库中肾癌组织中LncRNAs数据,通过高通量数据分析肾癌组织中LncRNAs的差异性表达,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肾癌组织中LncRNA PVT1的相对表达量.通过siRNA干扰技术以及基因过表达技术构建LncRNA PVT1的沉默载体和过表达载体,通过慢病毒转染人肾癌细胞系ACHN细胞,根据是否转染慢病毒以及慢病毒载体的类型,将ACHN细胞分成空白对照组、siRNA沉默组和siRNA过表达组.利用RT-qPCR和Western blot法检测Bcl-2、Bad、Bax和Caspase-3的表达水平.利用Transwell试剂盒检测细胞的侵袭,利用AV-PI试剂盒检测细胞的凋亡.以裸鼠为研究对象,进行种植瘤研究.结果 肿瘤组织中LncRNA PVT1的表达量明显升高(P＜0.05).RT-qPCR结果显示,siRNA沉默组的LncRNA PVT1、Sg1和促凋亡基因Bad、Bax和Caspase-3的mRNA表达量要明显低于空白对照组和过表达组(P＜0.05);siRNA沉默组的抑凋亡基因Bcl-2的mRNA表达量要明显高于空白对照组和过表达组(P＜0.05).Western blot结果显示,siRNA沉默组的LncRNA PVT1、Sg1和促凋亡基因Bad、Bax和Caspase-3的蛋白表达量要明显低于空白对照组和过表达组(P＜0.05);siRNA沉默组的抑凋亡基因Bcl-2的蛋白表达量要明显高于空白对照组和过表达组(P＜0.05).Transwell结果显示,siRNA沉默组细胞的侵袭能力要明显高于空白对照组和过表达组(P＜0.05);过表达组细胞的侵袭能力要明显低于空白对照组(P＜0.05);AV-PI试剂盒检测结果显示,siRNA沉默组细胞的凋亡率要明显低于空白对照组和过表达组(P＜0.05);过表达组细胞的凋亡率要明显高于空白对照组(P＜0.05).siRNA沉默组裸鼠移植瘤的直径明显大于空白对照组和过表达组(P＜0.05);过表达组裸鼠移植瘤的直径要小于空白对照组和siRNA沉默组(P＜0.05).结论 LncRNA PVT1通过靶向调控Sgl基因调控肾细胞癌的侵袭和凋亡.
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