乙型肝炎病毒全S蛋白反式激活蛋N1基因的克隆化

• 作 者: 白桂芹 成军 刘妍 吴顺华 蔺淑梅 黄燕萍 张树林
• 机 构: 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心,西安交通大学第一医院传染科
• 出 处: 世界华人消化杂志
• 发表日期: 2004年11期
• 关键词: 乙型肝炎病毒 全S蛋白 反式激活蛋N1基因 克隆
• 基金项目: 国家自然科学基金攻关项目,No．C03011402,No．C30070689军队“九、五”科技攻关项目,No．98D063军队回国留学人员启动基金项目,No．98H038军队“十、五”科技攻关青年基金项目,No．01Q138军队“十、五”科技攻关面上项目,No．01MB135~~

目的：应用抑制性消减杂交(SSH)技术及生物信息学(bioinformatics)技术筛选并克隆乙型肝炎病毒(HBV)全S反式激活新型靶基因，进一步阐明HBV感染相关疾病的发病机制．方法：以HBV全S蛋白表达质粒pcDNA3．1(-)-全S转染HepG2细胞，以空载体pcDNA3．1(-)为平行对照，提取mRNA逆转录为cDNA，经Rsal酶切后将实验组cDNA分成2组，分别与2种不同的接头衔接，与对照组cDNA进行二次杂交和二次PCR．并结合生物信息学技术，克隆HBV全S反式激活作用的新型靶基因．结果：