应用巢式PCR方法诊断微小隐孢子虫感染的实验研究

• 作 者: 杨光 周天鸿 李月琴 余新炳 朱一 马慧璇 荆春霞
• 机 构: 暨南大学医学院,暨南大学生命科学技术学院,中山大学中山医学院寄生虫学教研室
• 出 处: 热带医学杂志
• 发表日期: 2008年11期
• 关键词: 微小隐孢子虫 巢式PCR 诊断 Cryptosporidium parvum nested-PCR diagnosis
• 基金项目: 广东省医学科学技术研究基金（No.2007097、No.2006087）：暨南大学引进优秀人才研究启动基金（No.51205071）.

目的应用巢式PCR扩增方法诊断微小隐孢子虫感染。方法用昆明种小鼠通过免疫抑制方法建立动物模型，通过不连续蔗糖密度梯度离心法分离、纯化隐孢子虫卵囊。抽提DNA后，用巢式PCR扩增隐孢子虫的18S核糖体DNA，电泳、割胶回收后测序。结果成功建立隐孢子虫的小鼠免疫抑制动物模型，纯化后的隐孢子虫卵囊形状均一，呈圆形或椭圆形，大小在3-6um左右。经巢式PCR扩增，在840bp左右有一条特异性条带。通过测序和生物信息学分析，证实该基因序列与微小隐孢子虫18S具有高度同源性。结论巢式PCR方法扩增18S基因是诊断微小