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目的
探讨抗T细胞免疫毒素(immunotoxin,IT)体外对脐血T细胞的清除效率及对造血干/祖细胞的影响。
方法(1)用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶桥联酶标技术法(APAAP)分别测定了脐血、骨髓、外周血标本CD5+、CD8+ T细胞的百分率;(2)用单向混合淋巴细胞培养(MLC)方法比较了外周血与脐血MLC增殖反应;(3)分别用MLC法和噻唑蓝(MTT)比色法,观察了两组抗人白细胞分化抗原的单克隆抗体(CD5+、CD8+)与完整蓖麻毒素(Ricin)偶联制备的两组免疫毒素(CD5:Ricin、CD8:Ricin)对脐血T细胞增殖反应及对T淋巴细胞转化功能抑制的影响;(4)用造血祖细胞培养的方法观察两组免疫毒素对脐血粒单系祖细胞(CFU-GM)、早期红系祖细胞(BFU-E)及混合系祖细胞(CFU-Mix)的影响。
结果(1)脐血含有一定比例的CD5+及CD8+ T细胞亚群;(2)在MLC中外周血与脐血对异源抗原的增殖反应相似;(3) CD5:Ricin 10-10~10-8 mmol/L (M)、CD8:Ricin在10-9~10-8mmol/L浓度范围内均能有效降低脐血T淋巴细胞在MLC中的增殖反应,并能有效抑制T淋巴细胞转化功能;(4)两组IT在10-10~10-9mmol/L浓度下对三种造血祖细胞增殖反应无明显影响。
结论CD5:Ricin、CD8:Ricin在一定剂量范围内可以安全有效地去除脐血中T细胞,并且对造血祖细胞无明显影响。