SYBR Green实时定量PCR检测转基因大豆中外源基因拷贝数

• 作 者: 冀志庚 高学军 敖金霞 张明辉 霍楠
• 机 构: 东北农业大学生命科学与生物技术研究中心
• 出 处: 东北农业大学学报
• 发表日期: 2011年10期
• 关键词: real-time PCR SYBR Green Ι 转基因大豆 拷贝数 Lectin 35边界序列
• 基金项目: 国家转基因重大专项课题(2008ZX08012-001)

采用SYBRGreenIreal—timePCR方法检测转基因大豆中外源基因35S边界基因的拷贝数，以大豆凝集素基因（Lectin）作为内参照基因，以转基因大豆基因组DNA为内参照基因标准品，初始浓度为0．43仙g·μL^-1，进行5倍梯度稀释得到内参照基因C，值与起始模板量的相关性标准曲线：y=-2．9915x＋22．3321，R2=0．996；以含35S边界序列的质粒DNA为目的基因为标准品，初始浓度为0．64I,zg·μL^-1，同样进行5倍梯度稀释，建立目的基因C，与起始模板量