RagB过表达慢病毒载体的构建及应用

• 作 者: 欧翔 周志姣 皮银珍
• 机 构: 长沙市第一医院内分泌科,中南大学湘雅三医院病理科
• 出 处: 中国动脉硬化杂志
• 发表日期: 2016年7期
• 关键词: 慢病毒载体 C2C12细胞 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 Lentivirus Expression Vector C2C12 Cells Mammalian T

目的构建含有RagB的重组慢病毒表达载体,实现RagB基因在C2C12细胞中过表达,并检测熊果酸对该细胞中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（m TOR）活性的调节作用。方法使用Flag p LJM1 RagB（WT）、Flag p LJM1RagB（54L）和Flag p LJM1 RagB（99L）慢病毒载体作为模板,PCR扩增Flag-RagB（WT）、Flag-RagB（54L）和Flag-RagB~（99L）,然后将其亚克隆到p WPI载体的Swa I酶切位点之中,进行菌液PCR鉴定;将克隆好的p WPI-