小鼠B7-H4重组腺病毒的构建及鉴定

• 作 者: 闫佩毅 姚航平 钱韵 古丽娟 陶岚 张立煌
• 机 构: 浙江大学医学院免疫学研究所
• 出 处: 浙江大学学报：医学版
• 发表日期: 2008年5期
• 关键词: T淋巴细胞/免疫学 重组 遗传 腺病毒科/遗传学 转染 细胞增殖 细胞 培养的 质粒 T-Lymphocytes/immunol Recombination g
• 基金项目: 国家重点基础研究发展计划资助项目（2003CB515503）.

目的：利用AdEasy^TMXL system构建携带小鼠B7-H4基因的重组腺病毒,并鉴定其生物学活性。方法：以RT-PCR方法从C57小鼠肺组织中扩增B7-H4全长基因并克隆到T载体,然后测序鉴定。经Xhol和EcoR双酶切后接入pshuttle-CMV穿梭载体（简称PSC）,构建重组腺病毒的穿梭质粒PSC-mB7-H4,并电转化至BJ5183-AD-1感受态细菌,经筛选获得携带mB7-H4的重组腺病毒的质粒pmB7-H4/Ad。将此质粒转化人胚肾细胞（AD-293）产生复制缺陷的重组腺病毒mB7-H