【摘 要】
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目的:既往研究证实转染野生型乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因可以减轻缺氧引起的大鼠心肌细胞凋亡,本研究进一步探求ALDH2发挥心肌细胞保护作用的信号转导通路.方法:运用细胞缺氧模
【机 构】
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复旦大学附属中山医院上海市心血管病研究所,同济大学医学院
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目的:既往研究证实转染野生型乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因可以减轻缺氧引起的大鼠心肌细胞凋亡,本研究进一步探求ALDH2发挥心肌细胞保护作用的信号转导通路.方法:运用细胞缺氧模型,比较大鼠心肌细胞在转染野生和缺失型乙醛脱氢酶2(ALDH2*1/ALDH2*2)基因再缺氧后4-HNE、MAPK酶活性、bcl2和P53的改变,酶活性检测采用乙醛代谢法,4-HNE的检测用免疫组织化学法,MAPK信号通路酶(ERK1/2、JNK)磷酸化的改变用western blotting的方法检测,而bcl2用western blotting的方法检测.结果:转染ALDH2野生型(ALHD2*1)和缺失型(ALDH2*2)基因后再缺氧,对ROS的产生和MAPK途径(ERK1/2和JNK的磷酸化)均无影响(P＞0.05);而在转染缺失型ALDH2*2基因再缺氧组,除了有细胞凋亡的增加外,还有4-HNE的明显增加(P＜0.05).从bcl2的western blot结果分析,转染野生型(ALHD2*1)的缺氧心肌细胞bcl2表达增高,与缺失型(ALDH2*2)的结果相反.结论:ALDH2对缺氧引起的细胞凋亡损伤具有保护作用,与其减少4-HNE生成紧密相关.ALDH2的抗凋亡作用不以ROS-MAPK途径为主,而是涉及bcl2的ROS非依赖性刺激的凋亡途径.
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