【摘 要】
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[目的]构建抗潮霉素标记基因的雪莲抗寒SiPEBP基因植物表达载体,转化新疆粳稻,为提高水稻的抗寒性奠定基础.[方法]用PCR方法扩增目的基因,连接到pMD19-T Vector载体上,测序验
【机 构】
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新疆农业科学院核技术生物技术研究所,新疆农业科学院温宿水稻试验站
【基金项目】
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新疆维吾尔自治区自然科学基金项目(2011211839)
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[目的]构建抗潮霉素标记基因的雪莲抗寒SiPEBP基因植物表达载体,转化新疆粳稻,为提高水稻的抗寒性奠定基础.[方法]用PCR方法扩增目的基因,连接到pMD19-T Vector载体上,测序验证,经BamHⅠ和SacⅠ双酶切,将目的片段连接到pMDC32表达载体上,通过冻融法将该载体导入根癌农杆菌EHA105中,通过根癌农杆菌介导法转化新疆粳稻品种秋田小町.[结果]得到抗寒基因SiPEBP,并构建成SiPEBP植物表达载体.获得了具有潮霉素抗性的水稻愈伤组织,经PCR技术鉴定,目的基因已整合到水稻基因组中
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