【摘 要】
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以美国红枫基因组DNA为模板,采取L16(45)正交实验设计,对影响扩增反应的5个主要因素进行优化。结果表明:在20μL反应体系中,各因素的最佳配比为Mg2+浓度1.5mmol/L,dNTPs浓度2
【机 构】
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沈阳农业大学生物科学技术学院,辽宁省林业科学研究院,
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以美国红枫基因组DNA为模板,采取L16(45)正交实验设计,对影响扩增反应的5个主要因素进行优化。结果表明:在20μL反应体系中,各因素的最佳配比为Mg2+浓度1.5mmol/L,dNTPs浓度2.5mmol/L,引物浓度1.5μmol/L,模板DNA用量50ng,Taq DNA聚合酶用量0.5U。该体系的建立为SRAP技术在美国红枫分子辅助育种实践中提供了技术基础。
Taking the American Red Maple genomic DNA as a template, five major factors influencing the amplification reaction were optimized by L16 (45) orthogonal design. The results showed that the optimal ratio of each factor was 1.5mmol / L, 2.5mmol / L of dNTPs, 1.5μmol / L of primer, 50ng of template DNA and 0.5U of Taq DNA polymerase in 20μL reaction system. . The establishment of this system provided the technical basis for the SRAP technology in the American red maple molecular assisted breeding practice.
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