应用RT—PCR和斑点杂交法检测新疆梨树上的苹果锈果类病毒

• 作 者: 赵英 牛建新
• 机 构: 石河子大学农学院园艺系
• 出 处: 果树学报
• 发表日期: 2007年6期
• 关键词: 梨树 新疆 苹果锈果类病毒 RT—PCR CDNA探针 测序 Pear Xinjiang area ASSVd RT-PCR cDNA probe Seque

利用自行设计的方法分离提取总RNA，通过一对特异引物，分别扩增出不同梨树品种上苹果锈果类病毒的特异片段，通过对库尔勒香梨品种上获得的特异片段回收、克隆和测序。结果表明，该片段长250bp，与已发表的AF421195同源性为99％，在此基础上利用克隆的ASSVd质粒，通过RT—PCR合成了生物素标记的cDNA探针，利用该探针对梨样品进行了斑点杂交检测，取得了很好的检测效果。进一步证明该反应体系能很好地用于梨树苹果锈果类病毒的RT—PCR检测。