人源性肺癌噬菌体展示单链抗体库的构建

• 作 者: 张慧珍 杨继要 许东 范清堂 吴逸明
• 机 构: 郑州大学公共卫生学院环境卫生学教研室,郑州大学基础医学院组织与胚胎学教研室,郑州大学公共卫生学院劳动卫生学教研室
• 出 处: 肿瘤
• 发表日期: 2006年9期
• 关键词: 肺肿瘤 抗体 肿瘤 人体 单链抗体(scFv) 噬菌体展示 Lung neoplasms Antibodies neoplasm Human body Sing

目的：构建人源性肺癌噬菌体单链抗体库，为筛选肺癌相关抗原的抗体奠定基础。方法：提取肺癌转移淋巴结总RNA，用RT—PCR技术扩增人抗体重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）基因，在体外将VH和VL连接成单链抗体（ScFv）基因，并克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E中，电转化至感受态的大肠杆菌TG1，经辅助噬菌体超感染，形成噬菌体单链抗体库，采用限制性内切酶鉴定其多样性。结果：从肺癌转移淋巴结中成功提取RNA，逆转录PCR扩增出入可变区基因，连接形成单链抗体，最终构建了库容为1．2×10^8的抗人