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Car3.1是一种电压依赖性钙离子通道,cDNA全长7625bp.非洲爪蟾卵母细胞有表达外源基因的功能,被用于离子通道异源表达的研究中.pGEM—HE是卵母细胞的高效表达载体,但由于pGEM—HE多克隆位点处的酶切点较少,外源片段常不能直接插入.为了将Car3.1的cDNA表达于卵母细胞中,首先对pGEM-HE的多克隆位点和β-Globin 3’端下游的切点进行了改造,引入需要的酶切点,删除了妨碍重组和mRNA转录的位点.并将Car3.1的cDNA克隆到改造后的pGEM—HE载体中.将重组的质粒在爪蟾卵母