【摘 要】
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背景:核因子KB受体激活因子配体介导的Calciu m/N FATc1通路激活在破骨细胞分化中发挥重要作用.射干苷可通过激活雌激素受体达到雌激素样作用,但目前尚缺乏其对破骨细胞分化及功能影响的相关报道.目的:探讨射干苷对破骨细胞的作用及其机制.方法:体外培养小鼠骨髓巨噬细胞分化成熟后种入96孔板中(每孔为6×103个),分别加入5,10,20,30,40 μmol/L的射干苷,观察对破骨细胞分化抑制作用,筛选出作用最强的射干苷浓度.分别以不同浓度的射干苷干预核因子KB受体激活因子配体诱导的破骨细胞体外分化
【机 构】
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广州中医药大学第一临床医学院,广东省广州市510405;广州中医药大学第一附属医院,广东省广州市510405;广州中医药大学附属广州市正骨医院,广东省广州市510405
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背景:核因子KB受体激活因子配体介导的Calciu m/N FATc1通路激活在破骨细胞分化中发挥重要作用.射干苷可通过激活雌激素受体达到雌激素样作用,但目前尚缺乏其对破骨细胞分化及功能影响的相关报道.目的:探讨射干苷对破骨细胞的作用及其机制.方法:体外培养小鼠骨髓巨噬细胞分化成熟后种入96孔板中(每孔为6×103个),分别加入5,10,20,30,40 μmol/L的射干苷,观察对破骨细胞分化抑制作用,筛选出作用最强的射干苷浓度.分别以不同浓度的射干苷干预核因子KB受体激活因子配体诱导的破骨细胞体外分化过程,进行抗酒石酸酸性磷酸酶染色,观察射干苷对破骨细胞形成和功能的影响.通过钙离子振荡实验、Western Blot及RT-qPCR等实验,观察Calcium/NFATc1信号通路中上下游基因和蛋白的表达情况.实验方案经广州中医药大学第一临床医学院动物实验伦理委员会批准.结果 与结论:①射干苷可抑制破骨细胞形成,且抑制作用呈剂量依赖性,40 μmol/L的射干苷对破骨细胞分化抑制作用最强;②射干苷可抑制与破骨细胞形成相关的Acp5(TRAcP)基因以及c-Fos、Integrin β3蛋白的表达,同时抑制与骨吸收功能相关的Ctsk、基质金属蛋白酶9基因以及转录蛋白的表达;③射干苷可抑制钙离子信号通道的开放频率及强度、抑制Ctr(Calcitonin Receptor)、Nfatc1基因及转录蛋白的表达;④结果说明:射干苷可通过核因子KB受体激活因子配体诱导的钙离子信号通道抑制Nfatc1基因及转录蛋白的表达,从而抑制破骨细胞的形成及骨吸收功能.
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