时间分辨荧光免疫法检测日本鳗鲡的产酸克雷伯氏菌

• 作 者: 卢洁 郭松林 冯建军 王艺磊 朱洪泉 林鹏
• 机 构: 集美大学水产学院
• 出 处: 分析化学
• 发表日期: 2012年11期
• 关键词: 时间分辨荧光免疫检测 产酸克雷伯氏菌 日本鳗鲡 Time-resolved fluoroimmunoassay Klebsiella Oxytoca Angui
• 基金项目: 国家自然科学基金（Nos.30972281 31001136）, 福建省高等学校新世纪优秀人才支持计划（闽教科[2007]20号）, 集美大学创新团队基金项目（No.2010A001）资助

从皮肤点状出血的日本鳗鲡中分离出产酸克雷伯氏菌菌株B12,经福尔马林灭活后,注射新西兰兔,制备免疫抗血清,G蛋白亲和层析纯化得到抗体（IgG）,以固定于微孔板的IgG作为捕获抗体,Eu~（3＋）螯合物标记的IgG作为检测抗体,建立了产酸克雷伯氏菌的夹心型时间分辨荧光免疫检测法（TRFIA）,并研究了抗体浓度、免疫时间及离解时间对检测的影响。本方法检出限为5.0×10~3 cfu/mL;线性范围5.0×10~3～1.0×10~7 cfu/mL,相关系数达0.99以上。交叉反应表