【摘 要】
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目的通过体外、体内实验观察放射联合替莫唑胺治疗对胶质瘤U87-表皮生长因子受体的Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)细胞及其移植瘤的影响。方法(1)常规培养人脑胶质瘤U87-EGFRvⅢ细胞，CCK-8实验检测不同浓度的替莫唑胺对U87-EGFRvⅢ细胞增殖的影响，计算替莫唑胺的半抑制浓度(IC50)；将细胞分为对照组、6 Gy放射治疗组、12 Gy放射治疗组，分别以0、6、12 Gy边缘剂量照射后应用We
【机 构】
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天津医科大学第二医院神经外科伽玛刀中心，天津 300211,天津医科大学第二医院神经外科伽玛刀中心，天津 300211,天津市环湖医院神经外科伽玛刀中心 300350,天津医科大学第二医院神经外科伽玛
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目的通过体外、体内实验观察放射联合替莫唑胺治疗对胶质瘤U87-表皮生长因子受体的Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)细胞及其移植瘤的影响。
方法(1)常规培养人脑胶质瘤U87-EGFRvⅢ细胞，CCK-8实验检测不同浓度的替莫唑胺对U87-EGFRvⅢ细胞增殖的影响，计算替莫唑胺的半抑制浓度(IC50)；将细胞分为对照组、6 Gy放射治疗组、12 Gy放射治疗组，分别以0、6、12 Gy边缘剂量照射后应用Western blotting实验检测3组细胞侵袭相关蛋白和基因修复相关蛋白的表达；将细胞分为对照组、6 Gy放射治疗组、6 Gy放射联合替莫唑胺治疗组(经6 Gy剂量照射后加入5 mmol/L替莫唑胺)，24 h后应用Western blotting实验检测3组细胞侵袭相关蛋白和基因修复相关蛋白的表达；(2)应用对照组、6 Gy放射治疗组、6 Gy放射联合替莫唑胺治疗组细胞悬液制作裸鼠颅内移植胶质瘤模型，移植后第7、14、21天应用生物发光成像(BLI)检测裸鼠体内荧光素酶的表达并测量移植瘤体积，绘制裸鼠的生存曲线、体质量曲线。免疫组化染色检测颅内移植胶质瘤EGFRvⅢ、EGFR、基质金属蛋白酶(MMP)-9、血管内皮生长因子(VEGF)、Ki67的表达。
结果(1)替莫唑胺对U87-EGFRvⅢ细胞的IC50为5 mmol/L；与对照组比较，6 Gy放射治疗组细胞EGFRvⅢ、EGFR、MMP-2、MMP-9、VEGF、MGMT、蛋白激酶B(AKT)-1、β-链蛋白(β-catenin)和Ku70蛋白的表达增加，与6 Gy放射治疗组比较，12 Gy放射治疗组细胞EGFRvⅢ、EGFR、MMP-2、MMP-9、VEGF、6-氧-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)、AKT-1、β-catenin和Ku70蛋白的表达降低，差异均有统计学意义(P<0.05)；与6 Gy放射治疗组比较，6 Gy放射联合替莫唑胺治疗组细胞EGFRvⅢ、EGFR、MMP-2、MMP-9、VEGF、MGMT、AKT-1、β-catenin和Ku70蛋白的表达降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)与对照组、6 Gy放射治疗组比较，6 Gy放射联合替莫唑胺治疗组细胞的成瘤性低，移植后21 d生存率、体质量均较高。裸鼠移植瘤的体积较小，差异有统计学意义(P< 0.05)；对照组、6 Gy放射治疗组、6 Gy放射联合替莫唑胺治疗组裸鼠肿瘤组织EGFRvⅢ、EGFR、MMP-9、VEGF和Ki67的表达依次降低，差异有统计学意义(P<0.05)。
结论放射联合替莫唑胺治疗可以更好地抑制U87-EGFRvⅢ细胞及其移植瘤的侵袭和增殖能力。
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