【摘 要】
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目的 分析枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides,LBP)对过氧化氢刺激引起的人子宫内膜间质细胞(endometrial stromal cells,ESCs)凋亡的影响以及对同源物磷酸脂酶基因(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10,PTEN)/蛋白激酶(protein kinase,AKT)信号通路蛋白的激活情况.方法 体外培养传代人ESCs,实验设计对照组、LBP组、过氧化氢组以及治疗组共4
【机 构】
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邯郸市妇幼保健院妇产科,河北邯郸056002;邯郸传染病医院体检中心妇科,河北邯郸056002;邯郸传染病医院体检中心检验科,河北邯郸056002;河北工程大学医学院,河北邯郸056002;邯郸市中心
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目的 分析枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides,LBP)对过氧化氢刺激引起的人子宫内膜间质细胞(endometrial stromal cells,ESCs)凋亡的影响以及对同源物磷酸脂酶基因(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10,PTEN)/蛋白激酶(protein kinase,AKT)信号通路蛋白的激活情况.方法 体外培养传代人ESCs,实验设计对照组、LBP组、过氧化氢组以及治疗组共4组.对照组:常规培养液;LBP组:常规培养液+100 mg/L的LBP;过氧化氢组:常规培养液+100μmol/L的过氧化氢;治疗组:提前加入100 mg/L的LBP作用24 h,再加入100 μmol/L的过氧化氢,观察细胞在形态方面的改变.细胞活力检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)分析各组细胞的存活率,流式细胞技术测量细胞的凋亡率,比色法测量4组细胞中丙二醛(malondiald ehyde,MDA)的含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活力,蛋白免疫印迹分析细胞中 B 淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关 X 蛋白(Bcl-2 Associated X,Bax)、PTEN、AKT以及磷酸化的AKT(p-protein kinase,p-AKT)的含量.结果 LBP组和对照组相比,细胞形态、存活率、凋亡率以及细胞中的Bcl-2、Bax、PTEN、p-AKT和AKT比较,差异均无统计学意义(均P＞0.05).过氧化氢组和正常组比较,细胞呈圆形,脱落多而贴壁少;存活率[(51.37±3.28)％]降低,而凋亡率[(53.42±2.37)％]升高;MDA含量[(4.56±0.70)mmol/L]上升而SOD活力[(9.39±0.72)U/L]下降,胞质中 Bcl-2(0.148±0.020)和 p-AKT(0.457±0.053)含量降低,Bax(1.076±0.036)和 PTEN(0.538±0.049)含量升高(均P＜0.05).治疗组和过氧化氢组比较,细胞伸展且有短突起,脱落少而贴壁多;存活率[(87.72±4.52)％]升高,而凋亡率[(25.02±2.76)％]降低;MDA 含量[(2.14±0.47)mmol/L]下降而 SOD 活力[(16.60±1.25)U/L]上升,胞质中 Bcl-2(0.852±0.051)和 p-AKT(0.942±0.095)含量上升,Bax(0.202±0.014)和 PTEN(0.283±0.022)含量下降(均 P＜0.05).结论 LBP能明显拮抗过氧化氢刺激导致的细胞存活率降低及凋亡率升高,降低氧化应激产物,这与激活PTEN/AKT信号通路密切相关.
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